实验原理是通过脂类染料（如苏丹黑或油红O）对血清脂蛋白进行预染，之后将预染的血清放置于琼脂糖凝胶板上进行电泳分离。通电后，脂蛋白会向正极移动并形成多个区带。

试剂与器材

1. 巴比缓冲液（pH 8.6，离子强度 0.075）：电极缓冲液，由巴比/妥钠 15.4 g，巴比/妥 27.6 g，EDTA酸 0.292 g组成，溶解后加水至 1000 ml。

2. 三羟甲基氨基甲烷缓冲液（pH 8.6）：凝胶缓冲液，成分包括三羟甲基氨基甲烷 12.12 g，EDTA酸 0.29 g，NaCl 15.85 g，溶解后加水至 1000 ml。

3. 琼脂糖凝胶：使用琼脂糖 0.45 g，三羟甲基氨基甲烷缓冲液 50 ml，水 50 ml，加热至沸，待琼脂糖完全溶解后立即停止加热。

4. 挖槽工具：制作切口刀，刀口长 15 mm，中央夹有机玻璃或木片并用螺丝固定；挖槽小匙，用直径 15 mm 的铜丝制成，约 6 cm 长，一端锤成平面并用砂纸磨光。

5. 电泳槽和仪器：与血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳所用设备相同。

操作步骤

1. 预染血清：将 0.2 ml 血清与 0.2 ml 苏丹黑染色液混合于小试管，放入 37℃水浴中染色 30 分钟后，离心（2000 转/分，约 5 分钟）。

2. 制备琼脂糖凝胶板：将已配好的 0.45% 琼脂糖凝胶放入沸水中加热至融化，利用吸管将凝胶溶液倒入载玻片中，每片约 25 ml，静置约半小时待其凝固（在高温下可延长时间，也可放入冰箱加速凝固）。

3. 点加血清：在凝固的琼脂糖凝胶板一端约 2 cm 处，使用切口刀垂直切入凝胶后立即取出，接着用铜丝小匙将长方形小条凝胶取出。用小片滤纸吸去小槽内的水分，然后用血色素吸管吸取预染血清约 15 μl，注入小槽内。

4. 电泳：将加过血清的凝胶板平行放入电泳槽中，样品应处于阴极一端。两块三层纱布浸入巴比/妥缓冲液后轻轻贴在凝胶板两端，纱布另一端应浸入电泳槽中的巴比/妥缓冲液（注意：此电极缓冲液不能用三羟甲基氨基甲烷缓冲液代替）。接通电源，电压设置为 120~130 V，每片电流为 3~4 mA。电泳约 15 至 55 分钟后，可以观察到分离的色带。

注意事项

1. 电泳样品应为新鲜的空腹血清。

2. 每块凝胶上可平行挖两条小槽，以添加两个样品。

3. 若用与小槽形状的有机玻璃片在琼脂糖凝固前固定，在其凝固后取出，凝胶板上会留有小槽可直接加样。

4. 如果需要保存电泳样本，可以将电泳后的凝胶板（连同玻片）浸泡于清水中去盐 2 小时，然后放入烘箱（约 80℃）进行烘干。

结果及临床意义

1. 正常人血清脂蛋白可出现三条区带，从负极到正极依次为 β-脂蛋白（最深）、前 β-脂蛋白（最浅）、α-脂蛋白（略深于前 β-脂蛋白），原点处应无乳糜微粒。

2. 若前 β-脂蛋白比 α-脂蛋白深，与血清甘油三酯明显升高、胆固醇正常或略高相结合，可确认为 IV 型高脂蛋白血症。

3. 当 β-脂蛋白区带与正常血清明显增深，结合血清总胆固醇显著增高、甘油三酯正常者可确认为 IIa 型；若与血清总胆固醇增高、甘油三酯略高的前 β-脂蛋白略有溶解者则为 IIb 型。

4. 如果 β-和前 β-区带相连，称之为“宽 β 区带”，且血清甘油三酯和胆固醇均有所增高，可确认为 III 型。

5. 若原点出现乳糜微粒，且 β、前 β 均正常或降低，结合血清甘油三酯明显升高者，则可确认为 I 型。

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