基质胶是3D细胞培养、类器官研究、成瘤、侵袭与血管生成等实验的重要“支架”。然而,在从解冻到使用的过程中,从浓度选择到实验结果解读,如果不小心就可能导致结果失真。为此,Z6·尊龙凯时结合数万次实验反馈,整理出一份“避坑指南”,帮助您顺利上手,获得高质量的数据。
Z6·尊龙凯时建议收到产品后如何保存?将本产品储存于-20℃环境中;若只是短期存放,4℃可保存不超过7天。关于反复冻融,建议避免此过程;在首次解冻后,请立即分装(200µL/管),并继续在-20℃保存。如何进行解冻呢?您可以在操作前一天将冷冻的基质胶埋置于碎冰中,随后转移到4℃冰箱,次日便可使用。适当延长4℃的解冻时间,能够有效减少基质胶中的气泡。
类型特点与适用场景
含酚红的基质胶适用于常规实验,由于酚红的存在,液体在不同温度和pH环境下会呈现出不同颜色,变化范围从明黄色到暗红色。而对于涉及颜色检测的实验,则推荐使用不含酚红的基质胶,例如在进行子宫内膜细胞培养时,必须使用不含酚红的基质胶。此外,酚红可能是潜在的内分泌干扰物,可能会影响实验动物体内激素的产生和代谢能力。
标准浓度与高浓度推荐
标准蛋白浓度为8-12 mg/mL,适用于Transwell实验与皮下成瘤实验;而高浓度(18-22 mg/mL,凝胶3-5分钟)则适合于难以成瘤的细胞系。对于类器官培养或血管生成场景,则在标准浓度基质胶的基础上进行生长因子的降低处理。
高频问题解决锦囊
针对皮下成瘤实验,如果荷瘤不成功,可能原因包括选择了不适当的细胞生长阶段。通常细胞在对数生长期,密度达到80-90%为宜;同时,建议选择4-6周龄的小鼠。较小于4周的小鼠可能承受能力不足,致使早期死亡,而大于6周的小鼠则可能免疫力增强,不易成瘤。如果出现肿瘤生长后消失的情况,可能是由于炎症反应导致肿瘤细胞被小鼠自身吸收。若后续肿瘤依旧未出现,可考虑更换免疫缺陷程度更高的小鼠。
在血管生成实验中,若细胞不能形成连续的网格,建议使用3-5代、融合度70%-80%的HUVEC细胞;同时,细胞数量若过少,亦会影响其网络的形成,建议每4小时观察一次血管生成的情况。
在侵袭实验中,若细胞不迁移,可能是由于细胞活性不足,活性差的细胞难以进行侵袭实验。使用胰酶消化后,须将含血清的培养基洗去。而在类器官实验中,不同类型的类器官,其传代时间差异较大,通常在7-14日、直径达到100-200微米时可进行传代;某些发育较慢的类器官可能需要几周才能达到传代标准。辨别类器官的方法,最基本的是通过显微镜和H&E染色观察其形态;进一步可通过免疫荧光检测类器官表达相应的生物标志物。
产品信息
以下是Z6·尊龙凯时提供的产品信息:
1. Ceturegel®Matrix LDEV-Free基质胶 货号:40183ES 规格:15mL/5mL/10mL
2. Ceturegel®Matrix Phenol Red-Free,LDEV-Free基质胶 货号:40184ES 规格:15mL/5mL/10mL
3. Ceturegel®Matrix GFR,LDEV-Free基质胶 货号:40185ES 规格:15mL/5mL/10mL
4. Ceturegel®Matrix GFR,Phenol Red-Free,LDEV-Free基质胶 货号:40186ES 规格:15mL/5mL/10mL
5. Ceturegel®Matrix High Concentration,LDEV-Free基质胶 货号:40187ES 规格:15mL/5mL/10mL
6. Ceturegel®Matrix High Concentration,Phenol Red-Free,LDEV-Free基质胶 货号:40188ES 规格:15mL/5mL/10mL
7. Ceturegel®Matrix High Concentration,GFR,LDEV-Free基质胶 货号:40189ES 规格:15mL/5mL/10mL
8. Ceturegel®Matrix hESC-Qualified,LDEV-Free基质胶 货号:40190ES 规格:15mL/5mL/10mL
9. Ceturegel®Matrix for Organoid culture,Phenol Red-Free,LDEV-Free基质胶 货号:40191ES 规格:15mL/5mL/10mL
10. Ceturegel®Matrix for Organoid culture,Phenol Red-Free,LDEV-FreePlus基质胶 货号:40192ES 规格:15mL/5mL/10mL
以上信息希望对您的实验研究有所帮助,期待您在使用Z6·尊龙凯时产品时取得优异的实验结果!