本产品是基于探针法荧光定量PCR原理研发的一款检测试剂盒，具备以下突出特点：

产品特点

Z6·尊龙凯时的检测试剂盒即开即用，使用时仅需提供样品DNA模板，方便快捷。

经过优化的引物和其他组分，使得本产品具备高灵敏度。

附带阳性对照，有助于准确区分假阴性样品。

高特异性引物设计基于中间普雷沃菌的DNA序列高度保守区域，确保不会与其他生物样本DNA发生交叉反应。

该产品支持定性和定量检测，定量时线性范围至少可达到五个数量级。

本试剂盒可支持50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应，适合多次实验使用。

需注意的是，此产品仅限于科研用途，不适用于临床诊断。

使用方法

一、DNA提取（样本制备区）

采用自选的方法提取和纯化样品DNA，本试剂盒与市面上大多数核酸提取试剂盒兼容。

二、稀释标准曲线样品（样本制备区）

由于阳性对照浓度较高，请在独立区域进行以下稀释步骤，以避免污染样品或其他试剂。

1. 标记6个离心管，分别标记为7、6、5、4、3、2。
2. 用带芯枪头在每个管中加入45μL DEPC-H2O。
3. 在7号管中加入5μL 1×10⁸拷贝/μL的阳性对照，混匀后得1×10⁷拷贝/μL的标准曲线样品。
4. 更换枪头，在6号管中加入5μL来自上步的标准曲线样品，混匀得1×10⁶拷贝/μL。
5. 继续按照相同方法在5号、4号、3号等管中依次稀释，直至得到6个不同浓度的样品。

如果不需要制作标准曲线，可以将阳性对照稀释至1×10⁵拷贝/μL。

三、试剂配制（试剂准备区）

针对N个待检样品，准备N+2个qPCR管（包括1个阴性对照和6个阳性对照），向每个管中添加相应成分（见详细说明书）。

四、添加模板（模板添加区）

在每个qPCR管中添加2μL模板，顺序为阴性对照（DEPC-H2O）、待测样品、阳性对照，离心30秒后迅速进行扩增反应。

五、扩增反应（扩增及产物分析区）

将PCR管放入PCR扩增仪器样品槽中，实施扩增，具体程序请参考详细说明书。

六、结果分析

如果制作了标准曲线，以阳性对照浓度的log值为横坐标，Ct值为纵坐标绘制图形。根据待测样品的Ct值推算其DNA浓度log值。

如果未制作标准曲线，可以通过以下标准判断结果：

• 阳性对照：Ct值<30，显示明显的指数增长，呈现典型的S型曲线。
• 阴性对照：Ct值为38或无Ct值，无明显的增长阶段和平台期。
• 样本结果：Ct值<35，表示样本中检测到了婴儿利什曼虫，结果为阳性；Ct值为38或无Ct值则为阴性；若值在35-38范围内应复检。

运输及保存

应在-20℃下低温运输，保存有效期为一年，阳性对照需单独存放，避免污染其他试剂。Z6·尊龙凯时致力于提供高质量的科研产品，确保实验结果的准确性和可靠性。