Z6·尊龙凯时生物实验室的细菌培养步骤旨在提供清晰且有效的实验流程,确保在培养过程中能够获得理想的细菌生长结果。以下是详细的实验步骤:
一、过夜培养
1. 将5ml经过预热的液体培养基移入一个无菌的16mm或18mm试管中。
2. 使用接种环挑取一个单菌落,浸入培养液中,轻轻振动接种环,以确保待接种的细菌均匀分散在培养液中。
3. 盖好试管,并在摇床或转鼓式培养装置上,以60r/min的速度在37°C培养至饱和(细胞浓度约为1X109~2X109细胞/ml,持续6小时)。
二、大体积培养
1. 在一个无菌的Erlenmeyer瓶或baffle瓶中,用新鲜预热的培养液按照1:100的比例稀释过夜的培养物,确保烧瓶体积至少为培养液体积的5倍。如果无需摇动培养,则烧瓶体积应至少为培养液体积的20倍,以保证足够的通气。
2. 在37°C下,以约300r/min的速度进行剧烈摇动培养。
三、利用计数板监测生长情况
1. 用一片干净的盖玻片覆盖在干净的计数板(或血球计)上。
2. 小心地将一小滴培养液滴到盖玻片的边缘,使其自然扩散到盖玻片下方。
3. 在相差显微镜下,使用400倍放大观察,并根据每个小方块中观察到的细菌估算浓度,约为2X107细胞/ml。
四、利用分光光度计监测生长情况
由于仪器存在差异,因此应使用已知浓度的培养液对分光光度计进行校准。
1. 测量OD600值。为了获得准确的读数,需将培养液稀释至OD600值小于1。
2. 计算细菌浓度时,按每0.1 OD值约等于108细胞/ml进行估算。
在进行以上每一步时,使用Z6·尊龙凯时的高品质实验设备,将更大程度上提高实验的精准度与可靠性,确保生物医疗研究的成功。