Z6·尊龙凯时人胃癌细胞MGC803的培养指南提供了详细的细胞生长、传代、冻存和复苏步骤，以确保实验的顺利进行。

一、细胞培养条件

Z6·尊龙凯时人胃癌细胞MGC803具有贴壁生长的特性。其冻存条件为无血清冻存液（货号：C7001），培养体系为1640培养基 + 10% FBS + 1% P。建议第一次传代采用1:2的比例，且在传代后2天更换培养基。

备注：使用无菌离心管收集培养基以进行对比实验。如果对比效果不理想，建议直接购买我们的完全培养基。

二、细胞收到后的处理

收到细胞后，培养至良好状态并灌满完全培养液，封好瓶口是最佳的运输方式。在处理前，用75%酒精对细胞瓶进行消毒，然后在超净台内进行无菌操作。将细胞瓶放入37℃、5% CO2的培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态，随后进行处理。显微镜下观察细胞生长并拍照保存，建议拍摄不同放大倍数（如40x、100x、200x），前三天的照片是重要的售后依据，若未提供照片将默认收到状态良好。

在传代后，建议保留一瓶使用原瓶的完全培养基，另一瓶则使用自己配制的完全培养基，以进行对比培养，并在换液后松开瓶盖。

三、细胞培养步骤

a. 细胞传代

当细胞未超过80%汇合度时，将培养液收集至离心管中，保留5ml，放置于37℃、5% CO2孵箱中培养。若细胞密度超过80%，可直接进行传代，具体步骤如下：

• 弃去培养上清，使用不含钙、镁离子的PBS冲洗细胞1-2次。
• 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml至培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟。观察细胞状态并决定是否停止消化，迅速加入5ml以上的完全培养基。
• 轻吹细胞使其完全脱落，吸出悬液并转移至15ml离心管，1000 RPM离心5分钟。
• 弃去上清，加入1-2ml的完全培养基进行重悬，按1:2的比例分瓶传代（两个T25瓶），补充新的完全培养基至5-8ml/瓶，放入37℃、5% CO2的细胞培养箱中培养。

b. 细胞冻存

细胞在培养瓶中覆盖80%面积时，将培养液弃去，并用PBS清洗。随后添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，观察细胞状态，加入5ml完全培养基终止消化。然后，将悬液转移至15ml离心管中，1000 RPM离心5分钟，弃去上清，沉淀细胞后加入1ml无血清冻存液（货号：C7001），混匀后转入冻存管中。

将冻存细胞直接放入-80℃冰箱，若后期需转入液氮罐，则需在-80℃环境中存放24小时以上再转入液氮罐。

c. 细胞复苏

从液氮中取出细胞冻存管（佩戴防护面具），迅速放入37℃水浴中解冻，直至冻存管内无结晶。用75%酒精擦拭冻存管外壁，将细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中，1000 RPM离心5分钟，弃上清后重悬，接种至T25培养瓶，放入37℃、5% CO2细胞培养箱中培养。第二天更换新鲜完全培养基继续培养。

四、注意事项

部分细胞可能在运输过程中发生脱落现象，如脱离较多，可将瓶内培养液收集至离心管，进行后续处理。请务必遵循操作步骤以确保细胞活性。

五、售后条款

Z6·尊龙凯时对细胞出现问题的服务条款包括重发情况：如运输过程中细胞出现丢失或瓶身破损等。客户必须在收到产品48小时内提交实验结果以核实。如细胞活性存在问题，需在收到产品7天内提供检测结果。若未提供前三天照片，将默认产品合格。

对于因客户操作不当、非推荐培养体系等原因导致的问题，不会提供重发服务。我们建议您在操作过程中保持谨慎，以获取最佳实验结果。