Trizol试剂的主要成分为苯/酚，其主要功能是对细胞进行有效裂解，从而释放细胞内的蛋白质及核酸。虽然苯/酚能够有效引发表达蛋白质的变性，但它不能完全抑制RNA酶的活性。因此，Trizol中还加入了8-羟基喹啉、异硫氰酸胍、β-巯基乙醇等成分，以进一步抑制内源性和外源性RNA酶的活性。

Trizol试剂广泛应用于从细胞或组织中提取总RNA，能够在样品的裂解液或匀浆中保持RNA的完整性。在加入氯仿(CHCl3)后离心，样品可以分为水相层和有机层，其中RNA存在于水相层。收集水相层后，RNA可通过异丙醇沉淀进行回收。在去除水相层后，样品中的核酸与蛋白也可通过沉淀的方式分离。具体而言，乙醇沉淀用于析出中间层的DNA，而在有机层中添加异丙醇则可析出有机层的蛋白质。

Trizol试剂不仅适用于小量样品（如组织50-100mg；细胞5×10⁶），也同样适合于大量样品（如组织≥1g或细胞≥10⁷）。其适用范围涵盖动物、植物、细菌及血液样品，并能够同时处理多种不同类型的样品。提取过程中反应迅速，所提取的总RNA不存在DNA与蛋白质的污染，因此可放心用于Northern blot、RT-PCR及RNase保护分析等实验。

TRIZOL提取RNA步骤

1. 在提取组织RNA时，每50～100mg的组织需使用1ml Trizol试剂进行裂解；提取细胞RNA时，需先离心沉淀细胞，每5-10×10⁶个细胞添加1ml Trizol，并用枪吸取或剧烈振荡进行细胞裂解。

2. 将组织或细胞的Trizol裂解液转移至EP管，室温下放置5分钟。接着按比例加入氯仿（每1ml Trizol加0.2ml氯仿），盖紧管盖，然后用力摇晃15秒。随后在15-30℃下放置2-3分钟，最后以12000g（2℃-8℃）离心15分钟。

3. 将上层水相转移至新EP管，并按每1ml Trizol加0.5ml异丙醇的比例加入异丙醇。在室温下反应10分钟后，以12000g（2℃-8℃）离心10分钟。

4. 以每1ml Trizol加1ml 75%乙醇进行洗涤并涡旋混合，7500g（2℃-8℃）离心5分钟后弃去上清液。同时，让沉淀的RNA在室温下自然干燥，并用RNA酶自由水溶解RNA沉淀。

注意：在收集到生物材料后，最好快速进行RNA制备工作。若需暂时存储，应立即用液氮急速冷冻材料，并存放于-80℃的冷冻柜中。在制备RNA时，请务必从冷冻柜取出材料后，立刻以液氮研磨的方式处理，不可提前解冻，以避免RNase对RNA的破坏。选择Z6·尊龙凯时的Trizol试剂，可确保高效、安全的RNA提取过程。